Skip to content

Cinètica enzimàtica (Català)

Posted in Articles

Moltes substàncies i circumstàncies són capaces d’inhibir l’activitat enzimàtica, és a dir, reduir la velocitat catalítica. En primer lloc, els enzims es desnaturalitzen per les altes temperatures (excepte els enzims termòfils), els pals extrems (allà de nou excepte excepció), i algunes substàncies químiques especialment desnaturalitzades per a les proteïnes, com ara el dodecilfat de sodi (dels quals és l’efecte desitjat en deneder electroforesi), i alguns dissolvents orgànics com ara acetona i alta etanol. En tots aquests casos, les estructures secundàries i terciaries de proteïnes enzimàtiques estan prou desordenades per no permetre la formació d’un centre actiu. La inactivació enzimàtica dependrà de la concentració, o depèn de la temperatura o del pH de desnaturalització, i depèn del temps, que correspon al temps necessari per separar els enllaços febles responsables de l’estabilitat de les estructures secundàries i terciaries. Aquestes inhibicions són irreversibles. Hi ha una concentració i efectes dependents de temps irreversibles amb l’ús dels bloquejadors de productes químics del lloc actiu. Realitzen una inhibició covalent estable, segons una cinètica pseudo-ordre 1. És essencialment un reactius químics de la covalència vincula amb els grups de reacció de llocs actius que són els residus serins, treonine o tirosina residus., El -sh de la Residus de cisteïna, -Coó dels residus d’àcids asparticos i glutàmics, i els residus -nh2 o -nh-lysina, arginina i histidina. No és casualitat que aquests residus també siguin els responsables de la unió del substrat al centre actiu i als mecanismes de catàlisi (revisar la introducció). Per tant, aquestes proteasos de proteasa serine (activa gràcies a un serina al centre actiu) són inhibides per la fenilmetilsulfonyllion (PMSF), reactive -oh bloquejador dels residus serins accessibles; De la mateixa manera, les proteases de cisteïna són inhibides per iodoacetamide o n-etilmaleinimide (NEM), Thiol bloquejador reactius; O, les proteases aspartatives són inhibides per carbodiimides, i les proteases metàl·liques d’Edta, un agent quelant dels cations metàl·lics necessaris per a l’activitat catalítica. Per tant, aquests reactius es poden utilitzar per bloquejar aquestes activitats (junts, per exemple, en un còctel anti-proteasa), o caracteritzar una activitat enzimàtica (el PMSF inhibeix els enzims serins, però no els enzims de cisteïna o els enzims d’aspartat); D’altra banda, un haurà d’evitar si es vol determinar l’activitat enzimàtica corresponent. Els químics han desenvolupat reactius més eficients perquè més selectius; Per exemple, mentre que romandre en la família de les proteases, la tripsina és específicament inhibida per tosillsilloclorocetona (tlck) i chymotripsin per tosilfenilalanocetona (tpck), perquè només el primer pot accedir al lloc actiu en serine de tripsina, i el segon de la Cymotripsin per imitar Els residus d’aminoàcids reconeguts pel centre actiu, el residu lisina per a la tripsina i el residu de la fenilalanina per a la cymotripsina. Pel que fa al clorocetona, realitza la unió de la covalència estable amb la histidina del centre actiu, el de la tríada catalítica (ser-HIS-ASP). El grup Tosyl (Toluene-Sulfonyl) es dirigeix al centre hidrofòbic actiu de les proteases. Es diu marcatge d’afinitat.

A part d’aquests reactius químics que encara són molt útils per determinar els mecanismes catalítics i caracteritzar els enzims, moltes altres substàncies són capaces d’unir-se a l’enzim, però sense formar un enllaç covalent estable i inhibir-ne més o menys fortament en funció de la concentració de l’inhibidor. Aquests compostos són buscats per la indústria farmacèutica, que es dirigeix a enzims la inhibició de la qual portaria virtuts terapèutiques. Tant els inhibidors són compostos farmacològics, sintètics o de vegades naturals o fins i tot hemi-sintètics (modificats químicament a partir de molècules naturals). La seva enquadernació és reversible, com la dels substrats o substrats, de manera que es pot reduir l’efecte d’aquests inhibidors de la diàlisi (que desplaça l’equilibri enquadernador) o la dilució (que disminueix la concentració d’inhibidor i, per tant, mou l’equilibri per la llei de acció massiva). Per descomptat, les forces d’adhesió d’aquests inhibidors enzimàtics reversibles són del mateix ordre que els que vinculen els substrats: enllaços d’hidrogen, enllaços electrostàtics (“ponts salins”), interaccions hidrofòbiques i les forces de Van der Waals. Tingueu en compte que si la constant de dissociació de l’inhibidor de l’enzim (ki) és molt baix, el vincle serà gairebé irreversible.Veurem que tots els inhibidors no s’uneixen estrictament al lloc actiu, sinó que tots tenen un efecte sobre l’acte catalític.

Be First to Comment

Deixa un comentari

L'adreça electrònica no es publicarà. Els camps necessaris estan marcats amb *