Skip to content

Cinética enzimática (Galego)

Posted in Articles

Moitas substancias e circunstancias son capaces de inhibir a actividade enzimática, é dicir para reducir a velocidade catalítica. En primeiro lugar, as enzimas son desnaturalizadas polas altas temperaturas (excepto as enzimas termofílicas), o PHS extremo (alí nuevamente, excepto a excepción), e algunhas substancias químicas particularmente desnaturalizadas para proteínas, como dodecilfato de sodio (do que é o efecto desexado en denunciado electroforesis), e algúns disolventes orgánicos como acetona e alta etanol. En todos estes casos, as estruturas secundarias e terciarias de proteínas enzimáticas son suficientemente desordenadas para non permitir a formación dun centro activo. A inactivación enzimática será dependente de concentración, ou dependerá da temperatura ou do pH de desnaturalidade e dependente do tempo, que corresponde ao tempo necesario para eliminar as ligazóns débiles responsables da estabilidade das estruturas secundarias e terciarias. Estas inhibicións son irreversibles. Existen tal concentración e efectos irreversibles dependentes do tempo co uso dos bloqueadores químicos do sitio activo. Realizan unha inhibición covalente estable, segundo unha cinética de pseudo-orde 1. É esencialmente un reactivo químico de enlaces de covalencia cos grupos de reacción de sitios activos que son os residuos de serina, treonina ou residuos de tirosina., O -sh of the Residuos de cisteína, o -cooh dos residuos de ácido aspártico e glutámico e os residuos -NH2 ou -nh- lisina, arginina e histidina. Non é casual que estes residuos sexan os responsables de unir o substrato no centro activo e os mecanismos de catálise (revisar a introdución). Deste xeito, as devanditas proteasas de proteínas de serina (activa grazas a unha serina no centro activo) son inhibidas por fenilmetilsulfonillón (PMSF), bloqueador reactivo dos residuos de serina accesibles; Do mesmo xeito, as proteases de cisteína son inhibidas por iodoacetamida ou n-etylmaleinimide (NEM), os reactivos de bloqueador de Thiol; Ou, as proteasas aspartativas son inhibidas por carbodiimidios, e as proteasas metallo por EDTA, un axente quelante dos cións metálicos necesarios para a actividade catalítica. É, polo tanto, estes reactivos poden usarse para bloquear estas actividades (xuntos, por exemplo, nun cóctel anti-proteasas), ou a caracterizar unha actividade enzimática (o PMSF inhibe as enzimas de serina pero non a cisteína-enzimas ou as enzimas aspartativas); Doutra banda, terá que evitar se alguén quere determinar a actividade enzimática correspondente. Os químicos desenvolveron reactivos máis eficientes porque máis selectivos; Por exemplo, mentres quedando na familia de proteases, a tripsina é específicamente inhibida por TosylsylylChlorocetone (TLCK) e Chymotpsin por Tosylphenylalanylchlorocetona (TPCK), porque só o primeiro pode acceder ao sitio activo en Serina de Trypsin e o segundo da cymothpsin O residuo de aminoácidos recoñecido polo centro activo, o residuo de lisina para a tripsina eo residuo fenilalanino para a cymothpsin. En canto a Chlorocetona, realiza a unión de covalencia estable coa histidina do centro activo, a da tríada catalítica (SER-HISP-ASP). O grupo Tosyl (Toluene-Sulfonyl) ten como obxectivo o centro activo hidrofóbico de proteasas. Isto chámase marcado de afinidade.

Ademais destes reactivos químicos que aínda son moi útiles para determinar os mecanismos catalíticos e caracterizar as enzimas, moitas outras substancias son capaces de vincular a enzima, pero sen formar un enlace covalente estable e inhibilo máis ou menos fortemente dependendo da concentración do inhibidor. Tales compostos son buscados pola industria farmacéutica, que ten como obxectivo as enzimas cuxa inhibición usaría virtudes terapéuticas. Tantos inhibidores son compostos farmacolóxicos, sintéticos ou ás veces naturais ou mesmo hemi-sintéticos (químicamente modificados a partir de moléculas naturais). A súa unión é reversible, como a dos substratos ou substratos, polo que pode reducirse o efecto destes inhibidores de diálisis (que despraza o equilibrio vinculante) ou a dilución (que diminúe a concentración de inhibidor e, polo tanto, move o saldo da lei de acción masiva). Por suposto, as forzas vinculantes destes inhibidores de enzimas reversibles son da mesma orde que aqueles que vinculan os substratos (s): enlaces de hidróxeno, ligazóns electrostáticas (“pontes salinas”), interaccións hidrofóbicas e van der forzas waals. Teña en conta que se a constante de disociación do inhibidor de enzimas (ki) é moi baixa, o vínculo será case irreversible.Veremos que todos os inhibidores non se unen estrictamente ao sitio activo, pero que todos teñen un efecto sobre o acto catalítico.

Be First to Comment

Deixa unha resposta

O teu enderezo electrónico non se publicará Os campos obrigatorios están marcados con *